Il existe de nombreuses façons de mesurer la croissance bactérienne, et une façon est plus compliquée que l'autre. Bien que parfois la cohérence de la mesure doive être ignorée, le moyen le plus simple est de mesurer avec précision la croissance bactérienne, c'est pourquoi il est souvent utilisé. Les méthodes les plus couramment utilisées sont la surveillance et le comptage des bactéries, la mesure de la masse sèche ou humide et la mesure des niveaux de turbidité/turbidité. Le laboratoire de votre école doit disposer des outils et de l'équipement nécessaires pour effectuer au moins une de ces expériences.
Étape
Méthode 1 sur 3: Surveillance des bactéries vivantes
Étape 1. Préparez les ingrédients
Il existe de nombreux outils spéciaux qui doivent être préparés et peuvent ne pas être disponibles dans un laboratoire de biologie. Préparez tout l'équipement et les conteneurs avant de lancer l'expérience afin qu'il n'y ait pas de tracas pendant le processus. Vous aurez besoin de connaître immédiatement chaque ingrédient utilisé et les termes de base de cette expérience.
- Préparez la chambre de comptage. Il est doté d'une chambre intégrée, d'un verre de microscope et d'un microscope, il est donc facile à installer et à utiliser. Vous pouvez l'acheter dans un laboratoire ou un magasin de fournitures scolaires. Cet outil doit contenir des instructions qui vous guident tout au long du processus.
- Préparez une tasse verseuse ou une tasse à tartiner. Ces deux conteneurs vous permettent de surveiller les bactéries à l'intérieur.
- La culture est un terme utilisé pour décrire la croissance d'organismes dans une expérience.
- Le bouillon est un milieu liquide dans lequel la culture se développe.
Étape 2. Utilisez la méthode de la plaque de coulée ou de la plaque d'étalement
Vous pouvez également placer les bactéries directement sur le plat pour les visualiser à l'aide d'un microscope. Versez la culture sur une soucoupe et placez-la sous le microscope. Surveiller le nombre de cellules bactériennes présentes.
Étape 3. Assurez-vous que la dose de concentration est correcte
S'il y en a trop, les bactéries s'accumuleront les unes sur les autres et vous pourriez vous tromper. Diluer la culture en mélangeant plus de bouillon. S'il y en a trop peu, les résultats du calcul ne seront pas exacts. Filtrer le bouillon à l'aide d'un système de filtration.
Étape 4. Comptez les bactéries
La dernière étape consiste à compter les bactéries une par une. Regardez à travers la loupe dans la chambre de comptage et notez le nombre de bactéries que vous voyez. Comparez les résultats avec les résultats d'autres tests.
Méthode 2 sur 3: Mesure de la masse sèche et humide
Étape 1. Assurez-vous d'avoir le bon équipement
Cette méthode utilise un équipement coûteux et beaucoup de temps. Si votre laboratoire n'a pas l'équipement dont vous avez besoin, c'est une bonne idée d'utiliser une autre méthode. Cependant, si votre laboratoire est suffisamment bien équipé, nous vous recommandons cette méthode car elle fournit des résultats plus cohérents. Dans cette méthode, vous aurez besoin de:
- Four à convection hydraulique par gravité
- Conteneur de pesée en aluminium
- Un ensemble de flacons (flacons de laboratoire)
- Machine centrifuge (centrifugeuse) ou système de filtration de laboratoire
Étape 2. Assurez-vous que la culture est dans le flacon
Ajouter la culture à la citrouille. À ce stade, la culture doit être un bouillon, bien qu'elle soit à nouveau séparée plus tard.
Étape 3. Séchez le récipient de pesée en aluminium dans le four de laboratoire
À la place, vous pouvez utiliser une membrane filtrante en acétate de cellulose d'un diamètre de 47 mm et d'une taille de pores de 0,45 µm. Quel que soit le récipient de pesée que vous utilisez, pesez-le car il devra être déduit plus tard lors de la pesée des cellules bactériennes.
Étape 4. Remuez la culture dans le flacon jusqu'à ce qu'elle soit uniformément mélangée
La cellule coulera naturellement en raison de la gravité et devra être agitée pour se répartir uniformément dans le ballon. De cette façon, vous pouvez avoir plus d'échantillons.
Étape 5. Utilisez une centrifugeuse pour séparer les cellules bactériennes du bouillon
Cet outil fait tourner le ballon et s'équilibre rapidement de sorte qu'il draine le bouillon et laisse la culture dans le ballon.
Étape 6. Grattez la pâte sur la citrouille et mettez-la dans un récipient de pesée
Jetez le bouillon car vous n'en avez plus besoin. Cependant, ne vous débarrassez pas de la citrouille tout de suite car elle sera toujours utilisée.
Étape 7. Rincez la machine centrifuge et versez l'eau de rinçage dans le récipient
Déposer l'eau de rinçage du flacon sur les cellules bactériennes pour obtenir le poids humide.
Étape 8. Trouvez le poids sec
Pour mesurer le poids sec, placez le récipient dans le four et séchez à 100 °C pendant 6 à 24 heures selon les instructions du four et/ou du récipient de pesée utilisé. Assurez-vous que la température n'est pas trop élevée pour que les bactéries ne brûlent pas. Pesez les bactéries lorsque vous avez terminé et n'oubliez pas de réduire le résultat du poids du récipient de pesée.
Méthode 3 sur 3: Mesure de la turbidité
Étape 1. Préparez le matériel nécessaire
Vous aurez besoin d'une source lumineuse et d'un spectrophotomètre. Les deux peuvent être obtenus dans les magasins de fournitures de laboratoire. Le spectrophotomètre doit avoir des instructions qui vous guideront dans l'utilisation de l'instrument en fonction du modèle que vous possédez. Le prix du spectrophotomètre est assez abordable et facile à utiliser, de sorte qu'il peut devenir l'une des méthodes les plus couramment utilisées pour mesurer la croissance bactérienne.
Étape 2. Allumez l'échantillon
Selon le terme de Layman, la turbidité est le niveau de turbidité d'un échantillon. Vous devez obtenir le numéro de mesure de la turbidité, qui est mesuré en NTU (Unité de turbidité néphélométrique). Cet outil doit être calibré avant de pouvoir mesurer l'échantillon avec précision.
Étape 3. Enregistrez les résultats
La turbidité est affectée par le nombre de bactéries dans l'échantillon. Le spectrophotomètre vous indiquera également le pourcentage de transmission (%T). Ce chiffre augmentera si la turbidité diminue. Comparez les résultats avec les résultats d'autres tests pour mesurer la croissance bactérienne.
Avertissement
- Puisque vous avez affaire à une colonie bactérienne, prenez des précautions en portant des équipements de sécurité tels que des lunettes de sécurité et des gants. C'est aussi une bonne idée de porter un masque, surtout si vous ne connaissez pas le type de bactéries étudiées.
- Prenez des précautions avant de manipuler tout type de bactérie, même le type inoffensif. Assurez-vous que toutes les plaies ouvertes sur votre corps sont complètement couvertes avant de commencer.
