En chimie, la dilution est le processus de réduction de la concentration d'une substance dans une solution. La dilution en chaîne est la dilution répétée d'une solution pour augmenter rapidement le facteur de dilution. Cette procédure est généralement effectuée dans des expériences qui nécessitent des solutions très diluées avec une grande précision. Par exemple des expériences impliquant des courbes de concentration sur une échelle logarithmique ou des expériences pour déterminer la densité de bactéries. Les dilutions en chaîne sont largement utilisées dans les expériences scientifiques telles que la biochimie, la microbiologie, la pharmacologie et la physique.
Étape
Méthode 1 sur 2: Effectuer une dilution de base
Étape 1. Déterminez la solution diluante appropriée
Il est très important de déterminer le liquide à utiliser pour la dilution. De nombreuses solutions sont solubles dans l'eau distillée, mais ce n'est pas toujours le cas. Si vous diluez des bactéries ou d'autres cellules, faites-le sur un milieu de culture. Le liquide que vous choisissez sera utilisé pour toutes les dilutions en chaîne.
En cas de doute sur le diluant à utiliser, demandez de l'aide ou consultez en ligne. Recherchez des exemples d'autres qui ont fait des dilutions en chaîne similaires
Étape 2. Préparez un certain nombre de tubes à essai contenant 9 ml de diluant
Les tubes à essai sont utilisés pour les dilutions vides. Tout d'abord, placez l'échantillon non dilué dans le premier tube, puis procédez aux dilutions successives dans les tubes suivants.
- Étiquetez tous les tubes utilisés avant de commencer la dilution afin de ne pas vous tromper une fois l'expérience en cours.
- Chaque tube sera rempli de 10 dilutions, à partir du tube dont la substance n'a pas été diluée. La dilution dans le premier tube est de 1:10, suivie de 1:100 dans le deuxième tube, 1:1000 pour le troisième, et ainsi de suite. Déterminez la quantité de dilution qui doit être effectuée à l'avance, afin de ne pas gaspiller la solution diluante.
Étape 3. Préparez un tube à essai contenant au moins 2 ml de solution non diluée
La quantité minimale de solution à diluer requise pour effectuer cette dilution en chaîne est de 1 mL. Si vous n'utilisez que 1 ml, il ne restera plus de solution non diluée. Label BLM pour les solutions non diluées.
Bien mélanger la solution avant de commencer toute dilution
Étape 4. Effectuez la première dilution
Prélever 1 ml de la solution non diluée du tube à essai BLM avec une pipette et le mettre dans un tube à essai étiqueté 1:10 contenant 9 ml de diluant, puis bien mélanger. Il y a maintenant 1 ml de solution non diluée dans 9 ml de diluant. Ainsi, la solution a été diluée par un facteur de dilution de 10.
Étape 5. Effectuez la deuxième dilution
Pour la deuxième dilution, prélever 1 mL de la solution du tube 1:10, puis le mettre dans le tube 1:100 qui contient également 9 mL du diluant. Assurez-vous que la solution dans le tube 1:10 est complètement mélangée avant de l'ajouter au tube suivant. Encore une fois, assurez-vous que la dilution dans le tube 1:100 est complètement mélangée. La solution du tube 1:10 a été diluée 10 fois dans le tube 1:100.
Étape 6. Continuez cette procédure pour effectuer des dilutions à chaîne plus longue
Ce processus peut être répété autant de fois que nécessaire pour obtenir la concentration de solution souhaitée. Dans les expériences utilisant des courbes de concentration, vous pouvez effectuer des dilutions en chaîne pour produire un certain nombre de solutions avec des dilutions de 1, 1:10, 1:100, 1:1000.
Méthode 2 sur 2: Calcul du facteur de dilution et de la concentration finale
Étape 1. Calculez le rapport de la dernière dilution dans la dilution de la chaîne
Le taux de dilution total peut être déterminé en multipliant le facteur de dilution de chaque étape à l'étape finale. L'illustration mathématique est avec la formule Dt = D1 x D2 x D3 x … x D , RÉt est le facteur de dilution total et D est le rapport de diluant.
- Par exemple, disons que vous faites une dilution 1:10 4 fois. Branchez le facteur de diluant dans la formule: Dt = 10 x 10 x 10 x 10 = 10 000
- Le facteur de diluant dans le quatrième tube dans cette dilution en chaîne est de 1:10 000. La concentration de la substance après la dilution est 10 000 fois plus faible qu'avant sa dilution.
Étape 2. Déterminer la concentration de la solution après dilution
Pour déterminer la concentration finale d'une solution après une dilution en chaîne, vous devez connaître sa concentration initiale. La formule est Cfinir = Cdébut/D, Cfinir est la concentration finale de la solution diluée, Cdébut est la concentration initiale de la solution d'origine, et D est le taux de dilution prédéterminé.
- Par exemple: si vous commencez avec une solution cellulaire dont la concentration est de 1 000 000 cellules par ml et le taux de dilution est de 1 000, quelle est la concentration finale de l'échantillon dilué ?
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En utilisant la formule:
- Cfinir = Cdébut/RÉ
- Cfinir = 1.000.000/1.000
- Cfinir = 1000 cellules par ml.
Étape 3. Assurez-vous que toutes les unités sont identiques
Lorsque vous effectuez un calcul, assurez-vous que les unités sont toujours les mêmes à la fin du calcul. Si l'unité initiale est le nombre de cellules par ml, assurez-vous que les unités restent les mêmes à la fin du calcul. Si la concentration initiale est en parties par million (bpj), la concentration finale doit également être en unités bpj.
