Les pipettes sont des équipements de laboratoire utilisés pour mesurer et transférer de très petits volumes de liquides. La précision des mesures à la pipette est très importante car les différences de volume lâché par la pipette peuvent affecter les résultats expérimentaux. Pour garantir l'exactitude, il est important de vérifier l'étalonnage de la pipette tous les quelques mois. Le processus d'étalonnage est utile pour vérifier si cet équipement dégouline de liquide dans le bon volume, afin que des réparations puissent être effectuées si nécessaire.
Étape
Partie 1 sur 2: Vérification de l'étalonnage
Étape 1. Rassemblez le matériel nécessaire
Pour vérifier l'étalonnage de la pipette, vous avez besoin d'une pipette, de pointes de pipette, d'eau distillée, d'un bécher, d'un thermomètre, d'une balance et d'un godet de pesée. La balance utilisée doit être à l'échelle du microgramme pour calibrer la micropipette avec une valeur maximale de 1 L.
- Vous n'aurez pas besoin de plus de 5 ml d'eau. Remplissez le bécher d'eau.
- Assurez-vous que la pointe de la pipette est correcte et bien ajustée dans la pipette.
Étape 2. Mesurez la température de l'eau distillée
Mettez le thermomètre dans l'eau et laissez-le reposer pendant au moins une minute. Si la ligne rouge du thermomètre bouge toujours, attendez encore une minute. Après une minute, enregistrez la température. Prenez le thermomètre et séchez-le lorsque vous avez terminé.
La température de l'eau est importante à connaître, car elle sera utilisée pour les calculs effectués pour vérifier l'étalonnage
Étape 3. Placez le gobelet de pesée sur la balance et mettez la balance à zéro
Idéalement, la balance utilisée possède une porte et un espace isolé à l'intérieur. Placez la tasse de pesée dans la chambre de la balance et fermez la porte. Si votre balance n'a pas de compartiment ni de porte, placez simplement une tasse de pesée sur la balance. Appuyez sur le bouton « Zéro » ou « Tare » et attendez que la balance affiche zéro.
La mise à zéro de la balance réduit le poids du gobelet en plastique et vous permet de peser uniquement le poids de la substance placée dans le gobelet
Étape 4. Préparez la pipette pour l'étalonnage
Essuyez la pipette avec de l'éthanol avant de commencer et assurez-vous que rien n'obstrue la pointe de la pipette. Fixez la pointe de pipette appropriée à la pointe de pipette et déterminez le volume à tester.
Pour l'étalonnage, testez les volumes les plus petits et les plus grands qui peuvent être retirés de la pipette
Étape 5. Lavez la pointe de la pipette avant de la calibrer
Appuyez sur le bouton jusqu'à la première limite et plongez la pointe de la pipette dans l'eau distillée à une profondeur d'environ 2 mm. Relâchez le bouton pour absorber une partie du liquide, puis relâchez le liquide à nouveau en appuyant sur le bouton. Répétez cette étape trois fois pour laver les embouts compte-gouttes avant utilisation.
Appuyez sur le bouton jusqu'à la deuxième limite pour éliminer le liquide restant sur la pointe de la pipette, puis retirez la pipette de l'eau
Étape 6. Aspirez le volume d'étalonnage
Avec la pointe de la pipette positionnée à l'extérieur de l'eau distillée, appuyez sur le bouton jusqu'à la première limite. Plongez la pointe de la pipette à 2 mm de profondeur dans l'eau distillée et relâchez le bouton pour aspirer le liquide dans la pointe de la pipette. Attendez environ 1 seconde avant de retirer l'embout compte-gouttes de l'eau.
Assurez-vous que la pointe de la pipette est complètement immergée pendant le processus d'aspiration. Il ne doit pas y avoir de bulles dans l'embout du compte-gouttes ou le résultat peut être erroné
Étape 7. Versez le liquide dans le plat de pesée sur la balance
Placez la pointe de la pipette au fond du godet de pesée, puis appuyez sur le bouton de la pipette jusqu'à la première limite. Déplacez-vous vers un autre point, un peu éloigné de l'eau, puis appuyez sur le bouton jusqu'à la deuxième limite. Tout en maintenant le bouton enfoncé, soulevez la pointe de la pipette du godet de pesée.
Gardez l'embout attaché à la pipette car vous l'utiliserez à nouveau pour d'autres tests d'étalonnage
Étape 8. Notez le poids indiqué sur la balance
Fermez la porte de la cabine de balance si vous utilisez une balance de porte. Attendez que les chiffres ne changent plus. Écris dans ton carnet.
Il est important d'attendre que les chiffres sur l'échelle ne changent plus avant de les noter. Les notes vont mal tourner si vous n'attendez pas
Étape 9. Répétez ce processus pour effectuer la lecture au moins 10 fois
Remettez la balance à zéro, lavez les pointes de pipette avant utilisation, aspirez le même volume de liquide, prélevez le volume, puis notez le poids. Notez le poids d'eau distillée pour le même volume, puis faites la moyenne de toutes vos notes.
Vous pouvez répéter ce processus pour différents volumes si chaque volume est testé plusieurs fois
Partie 2 sur 2: Calcul du résultat de l'étalonnage
Étape 1. Définissez la formule du volume calculé
La formule pour calculer le volume de liquide éjecté par la pipette est V = w * Z, w est le poids de l'eau, Z est le facteur de conversion basé sur la densité de l'eau, tandis que V est le volume de la quantité d'eau supprimé.
- La variable Z peut être obtenue en calculant la densité de l'eau à partir de la température enregistrée au début de l'expérience.
- Par exemple: Si la température de l'eau est de 23°C, la valeur Z est de 1,0035 g/mg.
Étape 2. Calculez la moyenne globale des étalonnages de pipettes
Le volume d'eau libéré par la pipette a été pesé au moins dix fois. Pour faire la moyenne de toutes ces valeurs, additionnez-les toutes et divisez par 10. Si vous avez fait plus ou moins le processus, additionnez les résultats globaux, puis divisez par le nombre d'essais effectués.
- Par exemple: Le poids d'eau des 10 expériences que vous avez réalisées avec la pipette de 10 µL est le suivant: 9, 89, 10, 01, 10, 02, 9, 99, 9, 95, 10, 04, 9, 96, 10, 01, 9, 99 et 9, 98.
- La moyenne est: (9, 89 + 10, 01 + 10, 02 + 9, 99 + 9, 95+ 10, 04 + 9, 96 + 10, 01 + 9, 99 + 9, 98)/10 = 99, 84 /10 = 9 984
Étape 3. Insérez les variables dans l'équation et résolvez
Une fois que vous avez déterminé le nombre correct pour chaque variable, branchez-le dans la formule et complétez le volume calculé. Pour résoudre cette équation, multipliez simplement le poids moyen de tous les essais par la valeur Z.
Par exemple: V = w * Z = 9 984 * 1,0035 = 10 019
Étape 4. Calculez la précision de la pipette
Utilisez l'équation A = 100 x Vmoyenne/V0 pour calculer la précision de la pipette. A indique la précision de la pipette, Vmoyenne est le volume moyen calculé, et V0 est la valeur réglée sur la pipette. La valeur de précision doit être comprise entre 99 et 101 %.
- Si la pipette est correctement calibrée, la valeur calculée doit être très proche de la valeur réelle définie sur la pipette.
- Par exemple: A = 100 x Vmoyenne/V0 = 100 x 10, 019/10 = 100 x 1,0019 = 100,19%
- Cette pipette est correctement calibrée.
Étape 5. Si nécessaire, envoyez la pipette pour étalonnage
Si votre pipette ne réussit pas le test d'étalonnage, ne l'utilisez pas pour l'expérimentation pour le moment. Les pipettes sont des équipements de laboratoire très fragiles et coûteux. Vous ne pouvez pas réparer vous-même l'étalonnage, la pipette doit être envoyée en réparation. Alternativement, plusieurs entreprises viendront dans votre laboratoire et calibreront la pipette sur place.
